212个周期卵胞质内单精子显微注入术的临床效果
第21卷第1期Vol.21 ,No.1 2001年2月Feb 2001 生 殖 与避孕
212个周期卵胞质内单精子显微注入术的临床效果
韩金兰 曹英 董曦 曹翔 彭献东 严敬明
(上海集爱遗传与不育诊疗中心，上海200011)
目的 : 分析 木中w2 12周期OF地质内精子显微注入(intracytoplasmics perm injection,ICSI)的结果。方法:采用短才案超排卵后，分析其得卵率,ICSI后的卵裂率,4146率K 4i}振率与女方年龄的关系。结果:超排卵后每个周翔的得卵率10. 6个，ICSI后的卵裂率为87.04%,狂像率为32.55%,4娘结果为6例流产，63例分挽，获新生1L 74个。此外，妇女年龄与ICSI成功率有关。结论:穷方因素不孕夫扫用ICSI及胚胎移植后，能获得较好的狂祖效果，女方年龄与ICSI妊娘成功率有关。
关徽词:卵胞质内精子显微注人术(ICSD;胚胎移植;卵裂率;控制超排卵
中图分类号:Q492. 6;R711. 6 文献标识码:A 文章编号;0253-357X(2001)01-0047-03
不育症中、由于男性因素引起夫妇不育的比例约占1/3,还有部分不育是由夫妇双方原因所造成的.男性不育中，除少数因促性腺激素缺乏、某些精索静脉曲张、逆行性射精等原因可用药物或手术给子纠正外，对大多数男性不育缺乏拚异、有效的治疗方法.自1992年Palermo等川采用ICSI技术获得妊娠成功后，该技术作为治疗男性不育的方法在全世界普退被采用.
近一年来 ，我们对I”对不孕夫妇进行了212个周期的ICSI临床治疗，获得了69例临床妊娠.
材 料 与 方 法
一 、病 例 来源
1998年9 月一1999年7月，男方产重少精、弱精及无精的不孕夫妇1”对，男方均用血染色休检查核型正常，进行了212个周期的ICSI怡疗，选择ICSI的条件如下:①精子异常(参照WHO标准)闭中一项或多项异常者;。.梢子浓度<20X10,加1,h. 活力<2级;。.正常形态率<10纬闷.顶休正常率<50/u ;②阻塞性无精症，39例因男方无精拢,做无创伤寒丸内精子抽吸术〔nonsurgical sperm aspiration. NSA)后行ICSI,③常规IVF受精多次失败者.
二 、方 法
1, 卵 巢 超排卵及卵子收集均用短方案,G.RHa+FSH或hMG注射hCG后36 h在B超下经阴道取卵，井将卵细胞置子8%透明质酸醉溶液中，用针尖剔除法进行去卵丘处理，并进行成熟度评分，在B2溶液中培养2-4h进行ICSI.
2, 梢 子 制备精液液化后，加入3%13SA T6培养液父上游法收集精子，T6培养掖冷冻后1 000 r/min离心5 min,重复2次，调整精子浓度至0.8一工X工0'/ml备用.
3, 方 法 应用日本OLYMPUS公司显徽操作仪，自制穿刺针注射前将精子置于10%聚乙烯毗咯酮(polyvinyl pyrrolidone,. PVP)溶液中制动后注入到成熟的卵母细胞胞桨内，注射后培养14"-18 h观察有无原核形成,38 45 h有无2-4一细胞胚胎形成，取卵后48 h左右，在B超监侧下移植(4个胚胎至官腔.妊娠标准:胚胎移植后11--14 d检测血中hCG浓度，移植7周用B超检测宫内有无胚囊.见胚囊为临床妊娠
结果
一 、受 精 率
共 21 2个 周期，获卵22 48个，平均得卵数10.6 个/周期，其中成熟卵子15 69个占69.80 纬.我们将卵子分成四型:成熟型为第二次成熟分裂中期(MI工)，见第一极体，中间型为第一次成熟分裂中期(MI)，见不到极体;未成熟型为有生殖泡(GO存在者;闭锁型则有各种死亡现象，如透明带破裂，卵子缩小，发黑。
表1
熟程度
成熟 卵子数 ％
中间型 1569 69.80
未成熟 34 1.01
闭锁 124 5.52
卯子成熟度 521 23.90
成 功 进 行ICSI的卵子为1492个，授精后见卵裂1224个，占82.04 % , 正常受精卵948个，为77.45 ％，发育至》2-8一细胞的胚胎数为908个，占74. 18％
二、 临床结果212 个 周 期共移植胚胎数为646个每次移植1-4个，平均3. 05个/周期.胚胎移植后，有69例临床妊娠，临床妊振率为32.55%,63例分娩，获单胎53例，双胎9例，三胎1例;6例流产，其中5例为早期流产，1例孕5月流产.出生的孩子数74名，分别为女婴39名，男婴35名，其中1例男奥崎形，为膝外翻及双肾发育不良，
三、 妊 娘 率与女方年龄的关系
ICS I 后 是否妊振与女方年龄有关.<30岁妇女临床妊娠率达42Y, .140岁仅为12.5环，见表2.
表2 女方年龄与妊振率的关系
年龄 周期数 妊振数 成功率(%)
《30 78 33 42
30—34 72 21 29.1
35—39 54 14 25.9
》 40 8 1 12.5
总 数 212 69 32.5
讨论
在 IC SI 技术应用于临床之前，对男方精子质量严里缺陷或无精子者，由于药物治疗或手术很难进行纠正，一般只能用供精者的梢子做人工授精来生育后代.至本世纪九十年代初开始采用部分透明带切除(PZD)及透明带下授梢(SUZI)等显微助孕技术进行体外受精C-7. 但由于它们的受精率及妊娠率不高，且有多梢受梢的可能，现已逐渐被ICSI所取代.
我们从 1998年9月开始，开展了该项技术，10个月内对212个周期作了ICSI.获69例临床妊娠卜妊娠率为32. 55 .全部病例均获得妊娠结果，除5例发生早期流产及1例发生中期流产外，63例均已分娩其中双胎，例，三胎1例，共生育74个孩子，其中1例为先天畸形.ICSI后生育的孩子是否比自然妊娠或传统工VF胚胎移植后的晴形率高，尚无肯定的定论.有学者认为，乳动物卵母细胞的早期胚胎具有DNA修复能力以修正外界的不利影响，卵母细胞甚至可修补精子携带的外源性DNAI']因此推侧ICSI对喃乳动物生殖细胞的不利影响，在其导致胚胎和胎儿异常发育之前，已被生殖细胞和早期胚胎的生理性修复系统所修补.有作者称，ICSI后并不增加胎儿和出生婴儿的晴形率，但是染色体异常特别是性染色体异常则略有增加，.本文74个婴儿中有1例先夭畴形，我们尚待积票资料，注竞ICSI后对后代的影响.
ICS I技 术 现在作为治疗男性不育的方法已在全世界普遗采用，这种方法对精子类型几乎没有限制，不论精子质量如何，不论精子的来源(射出精子、附年或率丸精子)，只要有活精，其受梢率和妊娠率都无显著差异[..」。它与传统的试管婴儿一胚胎移植技术一样v1，其成功率与女方的年龄.即卵子质最有明显关系.我们的实践亦证明，30岁以内妇女做ICSI后临床妊娠率可达42Y.,随着妇女年的增加，其妊娠率便逐渐下降.->40岁时，妊娠成功率仅为12.5 % 。因此，不论进行传统体外受精胚胎移植术或ICSI后胚胎移植手术均应考虑
妇女的年龄及时治疗，以便提高妊娠率.
我们 在 用 传统休外受精胚胎移植多次失败的夫妇中，有9例夫妇其卵巢功能及精液常规都在正常范围，工VF时都全部不受精，次日用ICSI补救，虽绝大多数卵子能够受精，但所得的胚胎移植后均未获得妊娠.据此，我们对这些夫妇的男方进行精子顶体反应(AR)检查，半数以上AR<5%，由于AR是卵子受精率高低的一个预示指标，除初期阶段外，在本中心凡做IVFET者，男方精液检查中常规加做AR检查，使有些精液常规虽正常，原要做工VF-ET者，因为AR反应差而及早做ICSI,这也是提高妊娠率的措施之一
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